PCRの覚え書き

• 試薬を入れる順番：コンタミしたら困るものからチューブに入れる。 他の実験にも使う物を優先させること。 ただし、酵素は一番最後に入れる（失活したら困るから。）。基本的にMQ→buffer→dNTP→プライマー→鋳型→酵素の順番になると思います。
• 酵素の種類：大きく3種類の酵素を使い分けています。

• 1. 高正確：KOD-plus-Neo (TOYOBO)やPrimeSTAR (TaKaRa)
• 2. 高PCR成功率：KOD FX Neo (TOYOBO)やMightyAmp (TaKaRa)
• 3. 安い：Taq polymerase (greiner)

• クローニングのためなら1.が良いでしょうし、なかなか増幅しないテンプレートなら2.が良いでしょう。大腸菌のインサートチェックは3.で充分です。