北里大学 獣医生化学研究室 Lab of Veterinary Biochemistry, Kitasato University

エタノール沈殿

Ethanol Precipitation

エタノール沈殿
イソプロパノール沈殿
Ethanol Precipitation / Isopropanol Precipitation


  1. DNA溶液:99.5%エタノール:3M酢酸ナトリウムを1:2.5:0.1の割合で混合しボルテックスする(イソプロパノールの場合は1:1:0.1)。もし、DNA溶液が100 μlなら、99.5%エタノールを250 μl(イソプロパノールを100μl)、3M酢酸ナトリウムを10 μl入れる。Mix DNA solution : 99.5% ethanol : 3 M sodium acetate in a 1:2.5:0.1 ratio and vortex (for isopropanol: 1:1:0.1). For 100 µL of DNA solution, add 250 µL ethanol (or 100 µL isopropanol) and 10 µL of 3 M sodium acetate.
  2. -20℃で10分以上、静置する(長い分には問題ない)。Incubate at −20 °C for at least 10 minutes (longer incubation is fine).
  3. 4℃(室温でも可。4℃が望ましい)、>12,000xg、10分間遠心する。Centrifuge at >12,000 × g for 10 min at 4 °C (room temperature is acceptable but 4 °C is preferred).
  4. 上清をピペット(最初は1000 μl で、最後は100 μlでやるとやりやすい)で除く。Remove the supernatant by pipetting (starting with a 1000 µL tip, finishing with a 100 µL tip for easier handling).
  5. 70%エタノールをDNA溶液の等量入れる。Add 70% ethanol equal in volume to the original DNA solution.
  6. 4℃(室温でも可。4℃が望ましい)、>12,000xg、10分間遠心する。Centrifuge at >12,000 × g for 10 min at 4 °C (room temperature is acceptable but 4 °C is preferred).
  7. 上清をピペット(最初は1000 μlチップで、最後は100 μlチップでやるとやりやすい)で除く。Remove the supernatant by pipetting (starting with a 1000 µL tip, finishing with a 100 µL tip).